超分辨率显微镜的主要局限是什么?大多数远场超分辨率显微镜使用荧光标记。这方面的一个主要问题是它需要荧光团，其在实验的时间尺度期间经常漂白。这意味着信号将在测量过程中关闭，无法进行进一步分析。因此，能够在没有漂白的情况下进行超分辨率或者能够扰乱动力学的大型发色团，可能会非常棒。
如何使用拉曼光谱来克服这些问题?拉曼光谱本质上是无标记的。您可以将它与非常小的两个原子标签一起使用以提供更高的灵敏度，但在大多数情况下，您无需进入并标记样品。相反，您可以通过其独特的拉曼光谱同时查看几种化学成分。
由于拉曼光谱不涉及使用发色团，因此没有漂白。这解决了超分辨率显微镜中常见的漂白问题。请描述您最近开发的超分辨率拉曼显微镜技术。我们的技术结合了已有的两种不同技术。在显微镜领域，我们借鉴了受激发射耗尽显微镜(STED)的想法。我们将其与受激拉曼显微镜领域的专业知识相结合，创建了超分辨率显微镜技术。
基本上，我们的显微镜涉及三激光束技术，我们在样品中产生受激拉曼信号，然后我们可以在这个初始激发点周围的环形区域中将其关闭。我们只从这个甜甜圈的中心得到一个拉曼信号。这类似于STED如何与荧光一起工作。
这项技术的主要优点是什么?该系统的主要优点是它不含标签，因此您无需预先进行任何样品制备，以针对系统中的不同化学物质。
另一个关键优势是您可以同时查看多个组件。例如，在细胞中，我们可以看到我们添加到系统中的蛋白质，脂质种类和小分子。我们可以在实际空间和实时跟踪所有这些，无需任何大量的样品制备或标签。从这个意义上讲，这是非常有利的。
生物学之外还有许多系统，标签是不可能的。例如，采用有机光伏或电化学系统。将荧光标记整合到这些系统中是非常困难的，如果不是不可能的话。在纳米长度尺度上观察这些技术的大气光学成像技术开辟了新的机会。
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