在2019年9月/ 12月期刊上发表的一篇论文中,芝加哥伊利诺伊理工学院生物医学工程系的一组研究人员开发了一种新型微流体装置,用于实时测量肝脏分泌的胆固醇。含有人肝细胞的组织芯片。
他们的创新不仅在于开发第一个用于胆固醇检测的片上实时分析,而且还在于调整分析化学,这在常规的基于孔板的胆固醇到微流体形式的酶测定中是常见的,并且将其定位于微珠。这项创新可以帮助采用微流体培养的研究人员研究他汀类药物对实时降低胆固醇的影响。
组织芯片是开发治疗不同健康状况以及了解不同组织的潜在机制的药物的重要工具。然而,由于样品体积小,将组织芯片用于广泛应用存在普遍的挑战,细胞功能的片上评估通常非常有限。Abhinav Bhushan博士,芝加哥伊利诺伊理工学院(IIT)助理教授,该研究的主要研究者评论了这项工作:
“基于灌注的微流体细胞培养产生的样品体积较小,不能用于常规生化分析。我们基于珠子的胆固醇测定酶法测定是首次报道的可以定量测定人体肝细胞分泌的胆固醇的实验方法。这种方法是新颖的,因为这是首次报道使用基于珠子的酶固定化系统结合视觉检测实时定量胆固醇,我们设想我们的检测可以为在微流体中使用灌注的研究铺平道路样品量低。“
基于珠子的酶胆固醇检测系统使用固定在聚苯乙烯珠粒上的辣根过氧化物酶;胆固醇的整个氧化反应发生在珠子上。该氧化反应通过形成试卤素产生荧光信号,使珠子看起来是荧光的。每个珠子可以成像为一系列图像,其中荧光强度与样品中胆固醇的量成正比。该测定中使用的简单化学和检测使得测定更适合于实验室环境。
“虽然过去已经开展了生物分子检测系统的应用,如电泳,质谱,电喷雾电离和使用光电倍增管的荧光检测,但这是第一次非蛋白质分子实际量化。时间和片上使用固定化酶珠。它是测定化学的简单性和它的适应潜力,使我们的微流体测定独特“,Sonali Karnik博士说。谁是这篇文章的主要作者。
该团队表示,他们的下一步是将其酶测定与不同的测定化学多重化,以同时检测多个分子。
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