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酶活性指酶催化反应的能力即酶促反应速度。
表示常用国际单位。
国际单位定义表示酶量的多少,即1min能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)。
用SI制表示的酶活性单位为Katal(催量)。
每秒钟转化1个摩尔底物的酶量为1Katal。
常用单位为μKatal或nKatal。
国际单位和Katal间关系为:
1U=1μmol/min=16.67nmol/s=16.67nKatal
1.连续监测法中酶活性浓度的计算
在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度的方法。
连续监测法优点之一是计算方便,不需作标准曲线或标准管,用分光光度计监测酶反应过程时,很容易求出反应体系中每分钟吸光度变化,根据摩尔吸光系数可求出△A(相当测定物质变化的微摩尔数)。
计算中要考虑标本的稀释倍数,还应考虑光径不同时对△A的影响。
ε为微摩尔(线性)吸光体系
△A为吸光度变化
ν为标本体积(ml)
V为反应体系体积(ml)
L为光径(cm)
后面几项皆为常数,叫做酶活力浓度测定转化因子:
2.常数K值设置
在测酶时,常数K值的选择是很重要的。
比值过高虽然测定的线性范围较宽,但重复性差。反之,虽然精密度好,但线性窄。
K值设置的首发点应是测定酶的判断值或参考值上限,应保证这些值测定的可靠。
3.临床酶催化活性浓度测定的校准
由于临床酶催化活性浓度测定受测定方法和条件的影响,国际医学检验量值溯源委员会推荐了常用酶测定的参考方法。采用与仪器和试剂相配套的有溯源校准的校正测定系统,是发展趋势。
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