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科普测定酶活性浓度的两大类方法分别是什么呢

导读 近日有关于测定酶活性浓度的两大类方法分别是什么呢的问题受到了很多网友们的关注,大多数网友都想要知道测定酶活性浓度的两大类方法分别

近日有关于测定酶活性浓度的两大类方法分别是什么呢的问题受到了很多网友们的关注,大多数网友都想要知道测定酶活性浓度的两大类方法分别是什么呢的具体情况,那么关于到测定酶活性浓度的两大类方法分别是什么呢的相关信息,小编也是在网上进行了一系列的信息,那么接下来就由小编来给大家分享下小编所收集到与测定酶活性浓度的两大类方法分别是什么呢相关的信息吧(以下内容来自于网络非小编所写,如有侵权请与站长联系删除)

1.固定时间法(取样法、终点法、两点法)

先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。

用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。

该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。

2.连续监测法(速率法)

连续监测法具有测定准确等众多的优点,随着科学技术的发展,自动生化仪的使用,正在逐步取代“固定时间法”。实际工作中,测酶活性浓度常用酶偶联法。

最简单的酶偶联反应为以下模式:

A:底物

B:待测酶产物(不能直接测定)

C:指示酶产物(可以直接测定)

Ex:待测酶

Ei:指示酶

如果一些酶反应找不到合适的指示酶与其直接偶联,可以加入另一种酶,将两者连接起来,模式如下:

酶偶联反应与一般酶反应的一个重要区别是有一个明显的延滞期。从酶反应开始至稳态期间,指示酶反应较慢且不稳定,称为延滞期。

反应体系中不应有中间产物堆积,否则将导致误差。

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